［ 摘  要 ］ 目的：研究双灵固本散（原中华灵芝宝）对抗肿瘤作用机制及对放化疗增效减毒作用的分析， 同时达到调节免疫功能作用。 方法： 1）采用Ames实验方法检测抗突变作用及对10种人体肿瘤细胞生长抑制率影响及其与治疗的关系； 2）采用一期临床及二期临床对照试验结果，检测双灵固本散在放化疗中的增效减毒作用； 3）采用GL-B对小鼠脾细胞中IL-2，IL-6和TNF实验，证实对促进免疫细胞因子的产生作用。 结果： 1）例如双灵固本散治疗急性早幼粒白血病，观察CR患者血象及骨髓象，白细胞逐渐增高，分类中，早幼粒细胞减少，而中，晚幼粒细胞比例上升。 2）例如在人肝癌细胞药敏测定对照中显示，双灵固本散有显著增强肝癌细胞对化疗药物的敏感作用；在化疗中出现肝损害时的对照治疗观察，双灵固本散有显著的保肝治疗作用。 3）在临床治疗中可显著地使患者升高WBC，有效率高达93.52%。 结论：双灵固本散具有广谱抑杀肿瘤细胞的作用，能有效地起到放化疗保护剂作用，可以全面快速强力地提高人体免疫功能。

关键词：双灵固本散， 灵芝多糖， 灵芝酸，肿瘤， 细胞， 免疫

肿瘤研究的根本目的是降低死亡率及发病率，降低死亡率主要靠治疗。 近半世纪我国运用中西医结合治疗恶性肿瘤越来越被广大学者与病家所接受，已成为常用的治疗方法， 是恶性肿瘤综合治疗中的有效手段之一， 达到1/3可以预防，1/3可以治愈，1/3可以减轻痛苦、延长生命、提高生存质量。灵芝制剂是中药抗癌治疗的新项目，一直是医学界引人注目的课题。近年来，灵芝制剂在抗癌治疗中广泛应用，使癌肿疗效有了明显的提高，双灵固本散抗肿瘤研究及临床主要包括以下几个方面。

一、        双灵固本散抗肿瘤药理作用研究：

肿瘤细胞生物学及分子学的研究进展，新的肿瘤治疗途径及靶点的发现，为灵芝制剂抗肿瘤研究提供了新的思路及方法，双灵固本散由灵芝精粉，灵芝孢子粉与辅料经科学方法提取配制而成，其药理作用经实验得到进一步阐明。

1．  1诱导细胞分化及抗突变作用

诱导癌细胞自己使其向正常细胞分化作为一种潜在的治疗方法受到重视。灵芝有效成分(GL-B)-在0.25－0.5mg/ml的浓度下可明显诱导人早幼粒细胞白血病细胞（HL-60）向粒细胞系统分化，使G1期细胞群体明显增加。GL-B在0.5mg/ml浓度下可诱导黑色素脂（B－16）分化，使细胞中黑色素增加，细胞呈有序状排列。双灵固本散治疗急性早幼粒白血病，观察CR患者血象及骨髓象，治疗后的白血细胞逐渐升高，同时分类中、早幼粒细胞减少，而中、晚幼粒细胞比例上升，这些变化与维甲酸的诱导分化颇为相似。

对实体肿瘤主要诱导G₁期细胞凋亡，阻止肿瘤细胞进行脱氧核糖核酸复制，抑制肿瘤细胞生长。

基因稳态失衡是肿瘤发生的根本原因，预防恶性肿瘤的发生及彻底治愈恶性肿瘤，抗突变起重要作用。双灵固本散是有抗突变及减少、避免细胞突变作用，同时能帮助基因稳态的恢复（免疫作用）。上海预防医学研究院对双灵固本散抗突变作用以Ames试验，结果与我研究所试验一致。

抗突变作用  (修改的Ames试验)

1．2 促进细胞凋亡及杀伤肿瘤细胞

双灵固本散(原中华灵芝宝)诱导肿瘤细胞凋亡可行并在实验中得到证实。灵芝提取物（GL-E）和灵芝多糖（GL-B）在体外培养的肿瘤细胞无直接抑制作用，进入体内能阻滞HL-60细胞从S期进入G2及M期，24小时诱发细胞凋亡最为明显，缓解后的骨髓中可见粒细胞退行性改变，核固缩、核破裂―—“凋零小体”。我们分别进行了以下研究：给小鼠灌胃不同剂量的GL-E后观察S-180细胞凋亡，给小鼠灌胃不同剂量的GL-B后观察HL-60细胞凋亡。

含GL-E血清对小鼠S-180细胞增殖和凋亡影响（n=10）

含GL-B血清对小鼠HL-60细胞增殖和凋亡的影响(n=10)

双灵固本散中灵芝多糖及三萜类提取物等有效成分通过抑制细胞增殖的相关酶――端粒酶，形成有机共价结合，破坏端粒酶体活性，达到校正细胞失衡、校正端粒系统，从而达到影响细胞分裂核和DNA复制，直接杀伤癌细胞。同时，能抑制DNA拓扑异构酶I，延迟G1向S期移行，直接干扰DNA合成代谢；能抑制DNA拓扑异构酶II的DNA断裂重新连接反应，使染色体畸变和细胞死亡。

这种抗癌作用具有机制和化学结构独特、又有作用持久、抗癌谱广、无毒副作用反应等特点。

灵芝精粉和孢子粉混合物对肿瘤细胞生长的抑制率(%)

Growth Inhibition Rate of Mixture of Lucid Ganoderma and Licud Ganoderma Spore on Tumor Cell Lines

我所同中科院上海药物研究所丁健等研究对灵芝主要成分灵芝精粉和灵芝孢子粉混合物在体外对小鼠白血病细胞P388和10种不同类型的人肿瘤细胞株如: 人急性红白血病细胞K562、人单核白血病细胞U－937、人淋巴母细胞性白血病细胞HL-60、人胃中分化腺癌细胞SGC－7901、人胃高分化腺癌细胞MKN－28、人结肠低分化腺癌细胞HCT-116、人肝细胞癌细胞BEL－7402、人肺腺癌细胞SPC-A4、人非小细胞肺癌细胞A-549、人卵巢浆液腺癌细胞HO－8910等，证实双灵固本散对TOPO I 和 TOPO II的抑制是抑制肿瘤细胞生长的作用机制之一。

在二期临床试验中， 我们注意地观察了部分实体肿瘤，失去综合治疗的晚期患者， 单纯服用双灵固本散，连续服用一段时间观察，大部分患者有缓解症状， 减轻痛；部分患者能控制瘤体不增大；部分患者有一定程度的瘤体缩小，并且维持较长的时间；极少数患者出现瘤体消失，大多数后期复发。目前在恶性肿瘤病因及机理未完全清楚时，应加强深入全面的研究。

二、双灵固本散对恶性肿瘤放化疗增效减毒作用研究

肿瘤化疗已成为肿瘤综合治疗的重要组成部分，目前很多恶性肿瘤可被化疗根治，其地位越来越重要。但抗肿瘤药物的巨大毒副反应，严重困扰着抗肿瘤治疗，成为临床各科医师面临的现实难题。世界卫生组织（WHO）确定目前研究的重点是化疗保护剂；认为任何抗肿瘤治疗，如果以致残或严重损害生存质量为代价，即使肿瘤获得治愈，仍然不能说是成功的。所以必须从肿瘤缓解（CR、PR）和生存质量改善两方面做出综合评价。双灵固本散符合世界卫生组织确定的化疗保护剂（chemo-protectant agent）条例，可使化疗疗效有不同程度改变，包括对化疗药物的增效作用，结合用药计划疗程完成率为90%，明显高于单纯化疗（50%），结合用药化疗毒副反应明显减少或缓解。